紫外可見(jiàn)分光光度法檢測(cè)維生素C的含量
1 前言
維生素C(又稱L-抗壞血酸)是維持肌體正常生理功能的重要維生素之一。具有增強(qiáng)免疫力,預(yù)防感冒等疾病、抗氧化、解毒,減少煙、酒、藥物副作用、環(huán)境污染對(duì)身體的損害等作用。而人體不能制造維生素C,必須每天從富含維生素C的食物中攝取來(lái)滿足身體需要,長(zhǎng)期吸煙的人更需要服用維生素C。《中華人民共和國(guó)藥典》中對(duì)于維生素C的含量有明確的規(guī)定:本品為L-抗壞血酸。含量不得少于99.0%。目前維生素C含量測(cè)定的常用方法為手工滴定法,本文采用紫外分光光度計(jì)法,具有操作簡(jiǎn)單、快速等優(yōu)點(diǎn)。
2 儀器與試劑
2.1 儀器
Hanon i8雙光束紫外可見(jiàn)分光光度計(jì),50mL容量瓶,100mL容量瓶,10mm比色皿
2.2 試劑
維生素C對(duì)照液:25mg/mL,準(zhǔn)確稱取0.025g維生素C樣品,置于100mL棕色容量瓶中,用0.005moL/L的稀硫酸溶解并稀釋定容。
0.005moL/L的稀硫酸: 精確量取2.8mL的95%濃硫酸于100mL容量瓶中,加水稀釋至刻度,搖勻。
維生素C片(市售)
3 實(shí)驗(yàn)方法
維生素C在最大光吸收(λmax)為244nm,質(zhì)量濃度為2.04~18.36ug/mL區(qū)間內(nèi)符合朗伯-比爾定律。因此可以用標(biāo)準(zhǔn)曲線法測(cè)得維生素C的含量。
3.1繪制工作曲線
分別取0、1、2、3、4mL的維生素C對(duì)照液,注入50mL容量瓶中,用0.005moL/L的稀硫酸稀釋至刻度,搖勻,放置2min。以試劑空白作參比,分別測(cè)定維生素C標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光度,并繪制工作曲線。
標(biāo)準(zhǔn)曲線圖
3.2樣品測(cè)定
稱取維生素C片20片,研細(xì),準(zhǔn)確稱取約0.05g樣品,用0.005moL/L的稀硫酸溶解后定容至50mL,在244波長(zhǎng)處測(cè)定其濃度。
4 結(jié)果與討論
4.1 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
4.2 結(jié)論
從測(cè)試結(jié)果的RSD可看出用,此種方法測(cè)定維生素C的含量重復(fù)性好,方法簡(jiǎn)單、快速,提高了工作效率。
參考文獻(xiàn)
[1] 國(guó)家藥典委員會(huì). 中華人民共和國(guó)藥典[M] . 二部. 北京: 中國(guó)醫(yī)藥科技出版社, 2015:1238。
[2] 王少敏. 紫外分光光度法測(cè)定維生素C片中維生素C含量[J]. 天津藥學(xué),2007,(05):21-22.
注意事項(xiàng):
移取儲(chǔ)備液時(shí)一定要精確,標(biāo)準(zhǔn)曲線才會(huì)更準(zhǔn)確。比色皿使用時(shí)注意不要沾污或?qū)⒈壬蟮耐腹饷婺p,應(yīng)手持比色皿的毛面。比色皿在盛裝樣品前,應(yīng)用所盛裝樣品沖洗兩次,測(cè)量結(jié)束后比色皿應(yīng)用蒸餾水清洗干凈后倒置晾干。若比色皿內(nèi)有顏色掛壁,可用無(wú)水乙醇浸泡清洗。
