液相色譜法檢測(cè)動(dòng)物油中苯并芘
1 前言
苯并芘是最具代表性的國(guó)際公認(rèn)的強(qiáng)致癌物，幾乎不溶于水，可溶于苯、甲苯和環(huán)己烷，微溶于乙醇和甲醇。可通過呼吸、攝入和接觸等途徑進(jìn)入人體，可損傷生殖系統(tǒng)，易導(dǎo)致皮膚癌、肺癌、上消化道腫瘤、動(dòng)脈硬化和不育癥等疾病。苯并芘在自然界中廣泛存在，在油料加工和油脂生產(chǎn)中的不當(dāng)操作以及苯并芘的親酯能力可能使其污染食用油。
2 實(shí)驗(yàn)部分
2.1 實(shí)驗(yàn)原理
樣品經(jīng)溶劑溶解，通過氧化鋁柱吸附，用洗脫劑洗脫苯并(a)芘，用反相高效液相色譜分離，熒光檢測(cè)器檢測(cè)。
2.2 試劑和材料
高純水
石油醚
乙腈
四氫呋喃
甲苯
無水硫酸鈉
中性氧化鋁
2.3 儀器和設(shè)備
玻璃層析柱
恒溫水浴
旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀
Hanon LC7000高效液相色譜儀
2.4 試樣的制備
2.4.1 樣品的凈化
用玻璃燒杯稱取約0.4g試樣，精確到0.001g，用2ml石油醚溶解稀釋。
向?qū)游鲋屑右话敫叨鹊氖兔眩焖俜Q取22g氧化鋁與小燒杯中，立即轉(zhuǎn)移到層析柱中，輕輕敲打?qū)游鲎。寡趸X均勻沉淀。再裝入一層約30mm高度的無水硫酸鈉。向?qū)游鲋幸迫霕悠啡芤海?0ml石油醚洗脫，洗脫液前20ml棄去，換用圓底燒瓶收集其余洗脫液。
2.4.2 濃縮
將收集的洗脫液在65℃的水浴中旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至約1ml，移至玻璃樣品瓶中用氮吹儀吹干，4℃儲(chǔ)存?zhèn)溆谩?
2.5 樣品的測(cè)定
2.5.1 色譜條件
a)保護(hù)柱：Lichrosorb RP-C18，4.6mm×75mm，粒度5μm;
b)色譜柱：多環(huán)芳烴分析柱，4.6mm×250mm;
c)進(jìn)樣量：20μl;
d)流動(dòng)相：乙腈：水=88:12
e)流速：1ml/min;
f)熒光檢測(cè)器：發(fā)射波長(zhǎng)：406nm，激發(fā)波長(zhǎng)：384nm (狹縫均為10nm)
2.5.2 樣品分析
向裝有待測(cè)試樣的玻璃樣品瓶中加入乙腈溶液溶解樣品，經(jīng)孔徑為0.45μm的有機(jī)濾膜過濾后，待上機(jī)測(cè)試。
2.5.3 液相圖譜
