旋光法測(cè)定飼料中淀粉含量

1 實(shí)驗(yàn)原理

試樣用稀鹽酸分解，將溶解的淀粉糊化并部分水解。測(cè)定澄清溶液的總旋光度，校正因溶于40%乙醇的其他物質(zhì)及稀鹽酸處理后光學(xué)活性引起的旋光度用已知的系數(shù)來校正旋光度計(jì)算出的淀粉含量。

2 實(shí)驗(yàn)試劑和設(shè)備

乙醇(40%)體積分?jǐn)?shù)，鹽酸(分析純)，亞鐵氰化鉀(分析純)，乙酸鋅(分析純)等;分析天平，全自動(dòng)旋光儀等。

3 實(shí)驗(yàn)步驟

1)耗酸量的計(jì)算：

稱取約2.5g制備好的試樣(精確到1 mg)，定量轉(zhuǎn)移到50 mL錐形瓶中，加入25 ml水，振搖至形成均勻的懸濁液，將pH電極置于懸濁液中，用滴定管滴加鹽酸(0.31M)至pH為3.0，劇烈振搖懸濁液，并靜置2 min，檢查試料所消耗鹽酸是否平衡，如果在此過程中，pH升高超過3.0，再用滴定管滴加鹽酸(0.31M)，必要時(shí)可多次滴加鹽酸，直到不需要更多的鹽酸為止。

根據(jù)所用鹽酸(0.31M)體積計(jì)算出試料的耗酸量。

2)總旋光度的測(cè)定：

稱取約2.5 g制備好的試樣，精確到1 mg，定量轉(zhuǎn)移到于燥的100 mL容量瓶中，加25 ml鹽酸(0.31M)，振搖至形成均勻的懸濁液，再加人25 mL鹽酸(0.31M).

加人適量濃度的鹽酸，補(bǔ)償試樣的耗酸量，使容量瓶中內(nèi)容物的體積變化不超過1 mL.

將錐形瓶浸人沸水浴中中，在前3 min，用力振搖錐形瓶，以避免結(jié)塊并使懸濁液受熱均勻，振搖時(shí)錐形瓶不能離開水浴。如果同時(shí)測(cè)定多個(gè)試樣，錐形瓶不要同時(shí)放人水浴，每個(gè)樣品要間隔一定時(shí)間，以保持水浴沸騰。15 m in 士5s后，取出錐形瓶，立即加人溫度不超過 10℃的水(5.1)30m L，轉(zhuǎn)動(dòng)錐形瓶，在流水中冷卻至20℃左右。加入5 m L亞鐵氰化鉀溶液(I) ，振搖 1min，加人 5mL乙酸鋅溶液，振搖 1min，用水稀釋至刻度，混勻，過濾，棄去初始的數(shù)毫升溶液.

用旋光儀測(cè)定濾液的旋光度(a1)o

3)乙醇溶解物的旋光度測(cè)定

稱取5g制備好的試樣，精確至1 mg定量轉(zhuǎn)移到100 mL干燥的容量瓶中中，加40 ml乙醇(40%)，振搖至形成均勻的懸濁液，然后再加40 mL乙醇.

加適當(dāng)濃度的鹽酸以補(bǔ)充試樣的耗酸量，使瓶中內(nèi)容物的體積變化不超過1 ml.

用力振搖，在室溫下靜置 1h，在此期間至少每隔 10min振搖一次。

用乙醇稀釋至刻度，混勻，過濾，棄去最初數(shù)毫升溶液

吸取 50 mL濾液于 100m 工容量瓶，加人2.0 m L鹽酸用力振搖，并將其浸人沸水浴中中。

15 min 士5s后，從水浴中取出容量瓶，立即加溫度不超過 10℃的水30min，轉(zhuǎn)動(dòng)容量瓶并

在冷水中冷至20℃左右

加 5 mL亞鐵氰化鉀(I)溶液(5.6 .1 )，振搖 1min，加 5ml乙酸鋅溶液(5.6 .2 ) ，振搖 1m in，用水稀釋至刻度，搖勻，過濾，棄去最初數(shù)毫升濾液。用旋光度測(cè)定濾液的旋光度(a2)。

備注：

本方法不適用于含有在分析過程中具有光學(xué)活性，且不溶于 40%乙醇的淀粉以外的其他物質(zhì)的產(chǎn)品，如馬鈴薯漿，甜菜的絲、葉、根、冠，酵母，大豆產(chǎn)品，羽扇豆、富含葡萄糖的產(chǎn)品，如菊首根和菊芋等，此時(shí)可用酶法測(cè)定淀粉含量，否者測(cè)定淀粉含量偏高或偏低。

直鏈淀粉超過40%時(shí)，不宜用本法測(cè)定淀粉含量，如高直鏈玉米淀粉 HylonVII。