全自動(dòng)機(jī)械臂固相萃取儀－高效液相色譜法檢測(cè)水果中阿維菌素殘留量
1 前言
阿維菌素類農(nóng)藥是由鏈霉菌菌株代謝產(chǎn)生的一種大環(huán)內(nèi)酯類抗生素，主要包括阿維菌素、伊維菌素、依普菌素和甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽等，是一類具有高選擇性、高殺蟲(chóng)活性的新型農(nóng)畜兩用藥。目前廣泛應(yīng)用于蔬菜、水果中菜青蟲(chóng)、潛葉蛾和各種抗性蚜蟲(chóng)等的防治。世界衛(wèi)生組織將阿維菌素類農(nóng)藥分級(jí)為高毒化合物。采用海能全自動(dòng)固相萃取儀-高效液相色譜法進(jìn)行檢測(cè)水果中阿維菌素農(nóng)藥殘留，有效的縮短樣品中目標(biāo)物的固相凈化所需要的時(shí)間，提高了工作效率，也節(jié)約了人力；且能精準(zhǔn)的控制上樣、淋洗、洗脫等溶劑流速，提高了樣品目標(biāo)物的回收率。
2 儀器與試劑
2.1儀器
SPE400全自動(dòng)機(jī)械臂固相萃取儀；HN200多功能氮吹儀；高效液相色譜儀；分析天平；組織搗碎機(jī)；振蕩器；布氏漏斗；真空泵；其他常規(guī)玻璃儀器；濾膜（有機(jī)相，0.45μm）。
2.2試劑及耗材
實(shí)驗(yàn)用水應(yīng)符合GB/T6682中一級(jí)用水的規(guī)格，使用試劑除特殊說(shuō)明外，均為色譜純。
丙酮（色譜純）；甲醇（色譜純）；阿維菌素標(biāo)準(zhǔn)溶液：100μg/mL，甲醇作為溶劑。
固相萃取柱：C18，60mg/3ml。
3 實(shí)驗(yàn)方法
3.1取樣
將水果樣品用小刀將其切碎，再用組織搗碎機(jī)將其搗碎，裝入潔凈容器內(nèi)。
3.2提取
稱取搗碎后試樣約20g于具塞錐形瓶中，加入50mL丙酮，于振蕩器上真當(dāng)30min，用布氏漏斗抽濾，再用20mL丙酮洗滌具塞錐形瓶過(guò)過(guò)濾的殘?jiān)⒅貜?fù)一次。合并提取液，用氮吹儀定容約2mL。
3.3固相萃取柱凈化（C18柱）
表1 固相凈化條件
3.4濃縮
用氮吹儀吹至近干，準(zhǔn)確加入1.0mL甲醇溶解殘?jiān)儆?/span>0.45μm濾膜過(guò)濾，待測(cè)。
3.5色譜測(cè)定條件
色譜柱：ODS-C18，粒徑5μm，柱長(zhǎng)125mm，內(nèi)徑4.6mm；
流速：1.0mL/min；
檢測(cè)波長(zhǎng)：245nm；
柱溫：40℃；
進(jìn)樣體積：20μL。
流動(dòng)相：甲醇：水=（90+10，V/V），梯度如下表：
3.6定性分析和定量分析
以目標(biāo)化合物的保留時(shí)間定性；以外標(biāo)一點(diǎn)法定量（即選定峰高相近的標(biāo)準(zhǔn)工作液和樣品溶液中阿維菌素響應(yīng)值，并且在儀器檢測(cè)線性范圍內(nèi)），并做空白試驗(yàn)（不加樣品）。
4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
4.1計(jì)算公式
X——試驗(yàn)中阿維菌素殘留量，mg/kg;
h——樣品中阿維菌素峰高，單位為mm;
hs——標(biāo)準(zhǔn)工作溶液中阿維菌素峰高，單位為mm;
c——標(biāo)準(zhǔn)工作溶液中阿維菌素濃度，單位mg/L；
V——樣液最終定容體積，單位mL；
m——最終樣液代表的試樣量，單位為g。
4.2結(jié)論
采用SPE400全自動(dòng)機(jī)械臂固相萃取儀可以快速對(duì)樣品提取液進(jìn)行凈化和富集，可做到無(wú)人看守、批量處理，省去實(shí)驗(yàn)員繁瑣的加液取液等人工操作，方便快捷。采用SPE400全自動(dòng)機(jī)械臂固相萃取儀對(duì)樣品提取液可以精準(zhǔn)的控制進(jìn)樣、加液等流速，有利于固相小柱進(jìn)行萃取分離，從而實(shí)現(xiàn)較好的樣品檢測(cè)重復(fù)性。
參考文獻(xiàn)
[1]《GB 23200.19-2016 食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 水果和蔬菜中阿維菌素殘留量的測(cè)定》[S].