全自動機械臂固相萃取儀－高效液相色譜法檢測雞蛋中氟蟲腈殘留量

1 前言

氟蟲腈是一種苯基吡唑類殺蟲劑、殺蟲譜廣，其作用機制在于阻礙昆蟲γ-氨基丁酸控制的氯化物代謝，因此對蚜蟲、葉蟬、蠅類等重要害蟲有很高的殺蟲活性。采用海能全自動固相萃取儀-高效液相色譜法進行檢測動物源性食品中磺胺類藥物殘留，有效的縮短樣品中目標物的固相凈化所需要的時間，提高了工作效率，也節(jié)約了人力；且能精準的控制上樣、淋洗、洗脫等溶劑流速，提高了樣品目標物的回收率。

2 儀器與試劑

2.1 儀器

SPE400全自動機械臂固相萃取儀；HN200多功能氮吹儀；氣相色譜-質(zhì)譜儀：配有負化學源；絞肉機；粉碎機；分析天平；離心機；均質(zhì)器；其他常規(guī)玻璃儀器；濾膜（有機相，0.22μm）。

SPE 400全自動機械臂固相萃取儀

2.2試劑及耗材

實驗用水應符合GB/T6682中三級用水的規(guī)格，使用試劑除特殊說明外，均為分析純。

正己烷（色譜純）；乙腈（色譜純）；丙酮（色譜純）；

氯化鈉：650℃灼燒4h，置于干燥器中冷卻，備用。

丙酮+正己烷（3+7）：取300ml丙酮，加入700ml正己烷，搖勻備用。

PSA固相萃取小柱：丙基乙二胺鍵合硅膠，500mg/3ml。

氟蟲腈標準品：純度≧96.5%。

氟蟲腈標準溶液的配制：準確稱取適量標準品，用少量的丙酮溶解，并以丙酮配制成濃度為1.0mg/mL的標準儲備液。根據(jù)需要再用丙酮+正己烷稀釋成適當濃度的標準工作溶液。保存于-18℃環(huán)境下。

3實驗方法

3.1取樣

取適量雞蛋樣品進行勻漿，以備待用。

3.2提取

稱取勻漿后的雞蛋試樣5g于50ml具塞離心管中，加入5ml水，準確加入20ml乙腈，用勻漿機勻漿10min。再加入2.5g氯化鈉，劇烈振蕩10min，3000r/min，離心10min，取上清液備用。

3.3液-液分配凈化

取上層清液10ml轉(zhuǎn)移至50ml具塞離心管中，加入10ml正己烷，振搖3min，靜置分層，棄去上層正己烷相，再用10ml正己烷重復此操作一次，棄去正己烷；下層乙腈相收集，并在氮吹儀上以40℃濃縮近干，加入1.0ml丙酮+正己烷（3+7）溶解殘渣，作為備用液。

3.4固相萃取小柱凈化（PSA柱）

表1 固相凈化條件

進樣口溫度：250℃；

色譜-質(zhì)譜接口溫度：280℃；

載氣：氦氣，純度≧99.999%，恒壓模式，柱頭壓1.45MPa；

進樣量：1μL；

進樣方式：無分流進樣，0.65min后開閥；

電離方式：負化學電離；

離子源溫度：150℃；

四級桿溫度：150℃；

反應氣：甲烷，純度≧99.99%；

測定方式：選擇離子監(jiān)測方式；

選擇監(jiān)測離子（m/z)：定量366，定性333、368、400；

溶劑延遲：4.0min。

3.6 氣相色譜-質(zhì)譜檢測及確證

根據(jù)樣液中被測物含量情況，選定濃度相近的標準工作溶液，對標準工作溶液與樣液等體積參插進樣測定，標準工作溶液和待測樣液中氟蟲腈的響應值均應在儀器檢測的線性范圍內(nèi)。

如果樣液與標準工作溶液的選擇離子色譜圖中，在相同保留時間有色譜峰出現(xiàn)，并且在扣除背景后的樣品質(zhì)譜圖中，所選離子均出現(xiàn)，所選擇離子的豐度比與標準對應離子的豐度比，其值在允許范圍內(nèi)（允許范圍見表1）。在測試條件下，氟蟲腈保留時間是11.1min，其監(jiān)測離子（m/z)為m/z366、333、368、400（其豐度比為100:27:70:35）對其進行確證；根據(jù)定量離子m/z366對其進行外標法定量。

表1 使用定性氣相色譜-質(zhì)譜時相對離子豐度最大容許誤差

式中：

X——試樣中氟蟲腈殘留量，單位為mg/Kg;

h——樣液中氟蟲腈的色譜峰高，單位為mm;

hs——標準工作液中氟蟲腈的色譜峰高，單位為mm；

C——標準工作液中氟蟲腈的濃度，單位為μg/mL;

V——樣液最終定容體積，單位為mL;

M——最終樣液所代表的試樣質(zhì)量，單位為g。

參考文獻

[1] SN/T 1982-2007 進出口食品中氟蟲腈殘留量檢測方法氣相色譜-質(zhì)譜法[S].