凱氏定氮儀測定營養(yǎng)劑中蛋白質(zhì)含量
1 前言
短肽型腸內(nèi)營養(yǎng)劑,適應(yīng)癥為本品適用于胃腸道功能有損失,而不能或不愿進食足夠數(shù)量的常規(guī)食物以滿足機體營養(yǎng)需求的應(yīng)進行腸內(nèi)營養(yǎng)治療的病人,主要用于:(1).代謝性胃腸道功能障礙-胰腺炎-感染性腸道疾病-放射性腸炎及化療-腸瘺-短腸綜合癥-艾滋病病毒感染/艾滋病 (2). 危重疾病-嚴重?zé)齻瓌?chuàng)傷-膿毒癥-大手術(shù)后的恢復(fù)期 (3). 營養(yǎng)不良病人的手術(shù)前喂養(yǎng) (4).腸道準備本品能用于糖尿病病人。下面則為大家介紹一下短肽型腸內(nèi)營養(yǎng)劑中粗蛋白含量測定的方法。
2 實驗部分
2.1原理
短肽型腸內(nèi)營養(yǎng)劑中的有機態(tài)氮在濃硫酸和催化劑的共同作用下,轉(zhuǎn)化為氨態(tài)氮。加堿蒸餾后,用硼酸吸收后,再以硫酸標準滴定液進行滴定。
2.2 儀器與試劑、器具
2.2.1 K1100F全自動凱氏定氮儀(濟南海能儀器股份有限公司)。
2.2.2 SH420F石墨消解儀(濟南海能儀器股份有限公司)。
2.2.3 硫酸 分析純,c(HCL)=0.1mol/L,標準滴定液。
2.2.4 硼酸 分析純,質(zhì)量分數(shù)2%。
2.2.5 氫氧化鈉 分析純,質(zhì)量分數(shù)40%。
2.2.6 溴甲酚綠-甲基紅混合指示劑 將溴甲酚綠乙醇溶液(1g/L)與甲基紅乙醇溶液(1g/L)按5:1體積比臨時混合搖勻備用。
2.2.7 催化劑片 3g硫酸鉀和0.2g硫酸銅混合均勻壓片
2.2.8 50ml量筒
2.2.9 稱量瓶
2.3 實驗部分
2.3.1取樣:取0.3g左右的樣品,用無屑稱量紙包住投入消化管中,加催化劑一片(或硫酸鉀3g與硫酸銅0.2g),再沿瓶壁滴加硫酸8.0ml.
2.3.2消解:利用石墨消解爐進行消解,將消化管放在石墨爐上,蓋上排氣罩,連接廢氣吸收系統(tǒng),消化完畢后,將消化管取下冷卻至室溫。消化過程采用曲線升溫模式,設(shè)置參數(shù)如下:
2.3.3 待消化管內(nèi)溶液冷卻至室溫后,將消化管放置于定氮儀上。定氮儀設(shè)置程序如下:
稀釋水:30ml
硼酸: 25ml
堿: 30ml
蒸餾時間:5min
2.3.4 儀器自動滴定并給出計算結(jié)果。
3 結(jié)果與討論
式中:M-標準酸摩爾濃度(mol/L)
W-樣品質(zhì)量(g)
V0-空白樣滴定標準酸消耗量(mL)
V-樣品滴定標準酸消耗量(mL),精確到小數(shù)點后四位
6.25是蛋白質(zhì)系數(shù)
