凱氏定氮儀測定小牛血液中的揮發(fā)性鹽基氮
1 前言
牛肉含有豐富的蛋白質(zhì)，氨基酸組成比豬肉更接近人體需要，能提高機體抗病能力，對生長發(fā)育及手術(shù)后、病后調(diào)養(yǎng)的人在補充失血、修復(fù)組織等方面物別適宜。對于人的身體健康，牛肉可謂是一“寶”，那大家知道牛身上的另一“寶”嗎？準(zhǔn)確地說是小牛身上的一“寶”，那就是小牛的血。主要是小牛血去蛋白提取物，內(nèi)含多種游離氨基酸和肽。能促進(jìn)細(xì)胞對葡萄糖和氧的攝取與利用。在低血氧以及能量需增加等情況下，可以促進(jìn)能量代謝，增加供血量。
揮發(fā)性鹽基氮（TVB-N）指動物性食品由于酶和細(xì)菌的作用，在腐敗過程中，使蛋白質(zhì)分解而產(chǎn)生氨以及胺類等堿性含氮物質(zhì)。此類物質(zhì)具有揮發(fā)性，其含量越高，表明氨基酸被破壞的越多，因此營養(yǎng)價值大受影響。
2 實驗部分
2.1原理
根據(jù)《GB/T 5009.44-2003 肉與肉制品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)的分析方法》進(jìn)行測定。揮發(fā)性鹽基氮具有揮發(fā)性，加入堿性溶液后可以被蒸出， 用標(biāo)準(zhǔn)酸溶液滴定計算含量。
2.2 儀器與試劑、器具
2.2.1 K1100F全自動凱氏定氮儀(濟南海能儀器股份有限公司)。
2.2.2 SH420F石墨消解儀(濟南海能儀器股份有限公司)。
2.2.3 硼酸分析純，質(zhì)量分?jǐn)?shù)2%。
2.2.4 氫氧化鈉分析純，質(zhì)量分?jǐn)?shù)40%。
2.2.5 亞甲基藍(lán)-甲基紅混合指示劑 將亞甲基藍(lán)乙醇溶液(1g/L)與甲基紅乙醇溶液(2g/L)按1：1體積比臨時混合搖勻備用。
2.2.6 氧化鎂 分析純
2.2.7 100μL-1000μL移液槍
2.3 實驗部分
2.3.1取樣：精確量取5ml樣品至消化管中.加入20ml水搖勻后。
2.2.2加入1g氧化鎂固體后，迅速消化管放置于定氮儀上。
2.3.3 定氮儀設(shè)置程序如下：
稀釋水：30ml
硼酸：25ml
蒸餾時間：7min
2.3.4 儀器自動滴定并給出計算結(jié)果。
氮含量 
式中：M-標(biāo)準(zhǔn)酸摩爾濃度（mol/L)
W-樣品質(zhì)量（g）
V0-空白樣滴定標(biāo)準(zhǔn)酸消耗量（mL）
V-樣品滴定標(biāo)準(zhǔn)酸消耗量（mL），精確到小數(shù)點后四位
3 結(jié)果與討論
氮含量 
式中：M-標(biāo)準(zhǔn)酸摩爾濃度（mol/L)
W-樣品質(zhì)量（g）
V0-空白樣滴定標(biāo)準(zhǔn)酸消耗量（mL）
V-樣品滴定標(biāo)準(zhǔn)酸消耗量（mL），精確到小數(shù)點后四位
注意：
（1）如果測全血，儲存時應(yīng)放置在低溫環(huán)境下，以防止凝結(jié)成塊。
（2）由于揮發(fā)性鹽基氮具有一定的揮發(fā)性，建議現(xiàn)用現(xiàn)取，以免造成氮損失。
（3）氧化鎂雖起到一定的消泡作用，但如果在蒸餾過程中產(chǎn)生大量泡沫，可按實際情況增加氧化鎂的量，或直接加入少量消泡劑。
（4）氧化鎂的加入量可根據(jù)客戶需要自行調(diào)整。