凱氏定氮儀測定膠原蛋白粉中蛋白質(zhì)含量
1 前言
膠原蛋白粉，即膠原蛋白的粉狀制劑。膠原蛋白是人體蛋白的重要組成成分之一，起支撐器官、保護機體的作用。此外，膠原蛋白在食品領(lǐng)域中也有較為廣泛的應(yīng)用。相對于其他性狀的膠原蛋白產(chǎn)品來說，膠原蛋白粉的使用和保存都更為方便。下面則為大家介紹一下膠原蛋白粉中粗蛋白含量測定的方法。
2 實驗部分
2.1原理
膠原蛋白粉中的有機態(tài)氮在濃硫酸和催化劑的共同作用下，轉(zhuǎn)化為氨態(tài)氮。加堿蒸餾后，用硼酸吸收后，再以硫酸標(biāo)準(zhǔn)滴定液進行滴定。
2.2 儀器與試劑、器具
2.2.1 K1100F全自動凱氏定氮儀(濟南海能儀器股份有限公司)。
2.2.2 SH420F石墨消解儀(濟南海能儀器股份有限公司)。
2.2.3 硫酸 分析純，c(HCL)=0.1mol/L，標(biāo)準(zhǔn)滴定液。
2.2.4 硼酸 分析純，質(zhì)量分數(shù)2%。
2.2.5 氫氧化鈉 分析純，質(zhì)量分數(shù)40%。
2.2.6 溴甲酚綠-甲基紅混合指示劑 將溴甲酚綠乙醇溶液(1g/L)與甲基紅乙醇溶液(1g/L)按5：1體積比臨時混合搖勻備用。
2.2.7 催化劑片 3g硫酸鉀和0.2g硫酸銅混合均勻壓片
2.2.8 50ml量筒
2.2.9 稱量瓶
2.3 實驗部分
2.3.1取樣：取0.2g左右的樣品，用無屑稱量紙包住投入消化管中，加催化劑一片（或硫酸鉀3g與硫酸銅0.2g)，再沿瓶壁滴加硫酸8.0ml.
2.3.2消解：利用石墨消解爐進行消解，將消化管放在石墨爐上，蓋上排氣罩，連接廢氣吸收系統(tǒng)，消化完畢后，將消化管取下冷卻至室溫。消化過程采用曲線升溫模式，設(shè)置參數(shù)如下：
2.3.3 待消化管內(nèi)溶液冷卻至室溫后，將消化管放置于定氮儀上。定氮儀設(shè)置程序如下：
稀釋水：30ml
硼酸： 25ml
堿： 30ml
蒸餾時間：5min
2.3.4 儀器自動滴定并給出計算結(jié)果。
3 結(jié)果與討論
式中：M-標(biāo)準(zhǔn)酸摩爾濃度（mol/L)
W-樣品質(zhì)量（g）
V0-空白樣滴定標(biāo)準(zhǔn)酸消耗量（mL）
V-樣品滴定標(biāo)準(zhǔn)酸消耗量（mL），精確到小數(shù)點后四位
6.25是蛋白質(zhì)系數(shù)
