凱氏定氮法消解易起泡樣品應(yīng)用方案
采用凱氏定氮法測(cè)定氮或蛋白質(zhì)含量時(shí)，有些樣品在消化過(guò)程出現(xiàn)易起泡、掛壁等現(xiàn)象，最終會(huì)造成測(cè)試結(jié)果偏低。
通過(guò)分析研究表明，影響樣品消化的因素主要有以下幾個(gè)方面：樣品本身性質(zhì)(樣品含有大量的脂肪或碳水化合物)、樣品取樣量、催化劑的種類和使用劑量、濃硫酸使用量、消化過(guò)程中對(duì)溫度的控制及其它溶劑的加入等。
針對(duì)與此我們公司科研人員通過(guò)查閱大量相關(guān)資料，并進(jìn)行多次實(shí)驗(yàn)，取得了良好的解決方案，避免了樣品消化過(guò)程中起泡多，掛壁等現(xiàn)象的發(fā)生，為后續(xù)測(cè)試結(jié)果的準(zhǔn)確性提供了保證。現(xiàn)使用Hanon SH420F石墨消解儀，以伊利全脂奶粉為例進(jìn)行消化試驗(yàn)：
1. 稱取0.20～0.50g伊利全脂奶粉，加入0.2g硫酸銅，6g硫酸鉀及15-20ml濃硫酸，稍搖勻后，放入消解爐;
2. 建議采用曲線升溫方式，溫度設(shè)置如下：
3. 消化結(jié)束后，冷至室溫進(jìn)行下步測(cè)定。
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除上述方法外，其它方案如滴加雙氧水、脫脂處理等也可以達(dá)到消泡的目的。操作要點(diǎn)如下：
方案1：
1.1 取樣、加入催化劑、硫酸
1.2 升溫，在產(chǎn)生大量泡沫時(shí)，立即停止加熱，稍冷后(以不太燙手為宜)，沿壁緩緩加入少量H2O2(30%)，視具體情況重復(fù)添加;
1.3消化至澄清藍(lán)綠色，繼續(xù)消化30min～60min;
注：過(guò)氧化氫有著最廣泛的應(yīng)用，它有兩種功能：
⑴作為氧化劑對(duì)有機(jī)物加速分解
⑵作為阻泡劑在消化中控制泡沫
過(guò)氧化氫的使用在有硫酸的情況下反應(yīng)劇烈,因而能引起氮?dú)?N2)損失，而且在大多數(shù)情況下不能明顯的縮短消化時(shí)間。若使用過(guò)氧化氫，應(yīng)緩慢的沿管內(nèi)壁加入小于5毫升的量。
方案2：
2.1 消化前采用脫脂處理，建議采用冷浸提法;
2.2 揮去有機(jī)溶劑，按照以上方法進(jìn)行消化;
方案3：
3.1將樣品、硫酸、催化劑都準(zhǔn)備好，搖勻，隔天消化;
3.2建議曲線升溫進(jìn)行消化;
因樣品種類、催化劑種類、試驗(yàn)條件設(shè)備、實(shí)驗(yàn)環(huán)境差異等各種影響差異，需要實(shí)驗(yàn)操作者具體情況具體分析，進(jìn)行一些列適當(dāng)調(diào)整，以達(dá)到最佳的消化效果。