凱氏定氮法測(cè)定醫(yī)用膠原蛋白海綿中粗蛋白質(zhì)含量
1前言
膠原蛋白海綿是以牛跟腱為原材料,通過(guò)酶解、純化制取高純?chǔ)┬湍z原,再根據(jù)互貫網(wǎng)絡(luò)技術(shù)制成。 膠原分子兼有修復(fù)、止血和填充三種作用,能夠激活內(nèi)源性凝血途徑,在使用時(shí)通過(guò)壓迫創(chuàng)面激活內(nèi)源性凝血,以達(dá)到止血效果。本文采用《中國(guó)藥典》2015年版中氮測(cè)定法第三法以全自動(dòng)凱氏定氮儀進(jìn)行實(shí)驗(yàn),操作簡(jiǎn)單,測(cè)得結(jié)果平行性良好。
2 儀器與試劑
2.1儀器
K1160全自動(dòng)凱氏定氮儀,SH420F石墨消解儀
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2.2試劑
硫酸(分析純)、硼酸(分析純)、氫氧化鈉(分析純)、溴甲酚綠-甲基紅混合指示劑、硫酸鉀(分析純)、硫酸銅(分析純)、0.1mol/L硫酸標(biāo)準(zhǔn)滴定液等。
3 實(shí)驗(yàn)方法
3.1取樣
將膠原蛋白海綿置于恒溫干燥箱80℃干燥3h,干燥完后放置于干燥器中備用。將樣品剪成小塊狀,然后準(zhǔn)確稱量樣品100mg(精確至0.1mg),加硫酸鉀 0.3g 與硫酸銅 0 .02g ,再加硫酸2mL。同時(shí)做空白實(shí)驗(yàn)。
3.2消解
利用石墨消解爐進(jìn)行消解,將消化管放在石墨爐上,蓋上排氣罩,連接廢氣吸收系統(tǒng),設(shè)定消解溫度參數(shù)如下表:

4 結(jié)果與討論
4.1實(shí)驗(yàn)結(jié)果:儀器自動(dòng)滴定并計(jì)算,計(jì)算公式如下:
4.2實(shí)驗(yàn)結(jié)論
通過(guò)以上測(cè)得數(shù)據(jù)可知,利用全自動(dòng)凱氏定氮儀測(cè)定醫(yī)用膠原蛋白海綿蛋白質(zhì)含量平行性良好,且具有操作簡(jiǎn)單,安全性高,節(jié)省人力等優(yōu)點(diǎn)。
參考文獻(xiàn)
《中國(guó)藥典》2015年版 第四版 0704 氮測(cè)定法 第三法
