凱氏定氮法測(cè)定小鼠飼料中粗蛋白質(zhì)含量
1 前言
實(shí)驗(yàn)小鼠應(yīng)喂給顆粒性飼料,即將麥粉、玉米面、麥麩、豆餅、魚(yú)粉、草粉等按配方混合后制成干燥塊料或粒料。小白鼠的食量雖小,但對(duì)飼料質(zhì)量的要求相對(duì)較高,必須保持營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的平衡穩(wěn)定,富有蛋白質(zhì)等,否則對(duì)其發(fā)育、繁殖和抗病能力會(huì)造成嚴(yán)重影響。《GB 14294.3-2010 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 配合飼料營(yíng)養(yǎng)成分》中明確規(guī)定了實(shí)驗(yàn)小鼠生長(zhǎng)、維持飼料中粗蛋白的含量應(yīng)≥20%。本方案采取凱氏定氮法來(lái)測(cè)定某實(shí)驗(yàn)小鼠飼料中粗蛋白含量。
2 儀器與試劑
2.1 儀器
K1100/1100F 全自動(dòng)凱氏定氮儀,SH420F 石墨消解儀,分析天平
2.2 試劑
硫酸滴定液c(H+)=0.1018mol /L、2%硼酸溶液、40%氫氧化鈉溶液、溴甲酚綠-甲基紅混合指示劑、催化劑片等。
3 實(shí)驗(yàn)方法
3.1樣品制備
取樣品適量用粉碎機(jī)打碎且混合均勻。
3.2 實(shí)驗(yàn)過(guò)程
稱(chēng)取制備好的樣品約0.5g(精確至0.1mg),用稱(chēng)量紙包好后一并投入消化管中,加一片催化劑片(或者3g硫酸鉀、0.2g硫酸銅),加入10mL濃硫酸。
利用石墨消解爐進(jìn)行消解,將消化管放在石墨爐上,蓋上排氣罩,連接廢氣吸收系統(tǒng),
設(shè)定消解溫度參數(shù)如下表:
4.2結(jié)論
使用凱氏定氮儀測(cè)試該實(shí)驗(yàn)小鼠飼料中粗蛋白含量平均值為20.324%,平行性良好,符合國(guó)標(biāo)要求。
參考文獻(xiàn)
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[2] GB/T 6432-94 飼料中粗蛋白測(cè)定方法[S].
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