凱氏定氮法測定人血白蛋白中的蛋白氮含量

1 前言

人血白蛋白是由健康人血漿，經(jīng)過低溫乙醇蛋白質(zhì)分離法或經(jīng)批準的其他分離法分離純化，并經(jīng)60℃10小時加溫滅活病毒后制成。其中蛋白質(zhì)含量是其需要檢定的指標之一，本實驗參照藥典中的方法使用全自動凱氏定氮儀對其蛋白質(zhì)含量進行測定。

2 儀器與試劑

2.1儀器

K1100F全自動凱氏定氮儀，SH420F石墨消解儀，分析天平。

2.2試劑

硫酸（分析純），20g/L硼酸溶液，溴甲酚綠-甲基紅混合指示劑，40%氫氧化鈉。

3 實驗方法

3.1樣品制備

3.1.1非蛋白氮供試品溶液的制備

精密量取供試品2mL，加水14mL，10%鎢酸鈉溶液2mL，0.33moL/L硫酸溶液2mL，搖勻，靜置30分鐘，過濾，棄去初濾液，取續(xù)濾液作為非蛋白氮供試溶液。

3.1.2總氮供試品溶液的制備

取混合好的供試品，精確量取2.5mL，置10mL容量瓶中，用水稀釋到刻度，作為總氮供試品溶液。

3.2取樣

分別精確量取1mL制備好的總氮溶液及1mL非蛋白氮溶液加入消化管中，各加入0.3g硫酸鉀與30%硫酸銅水溶液5滴，再沿瓶壁滴加硫酸2.0ml。

3.3消解

4 測試結(jié)果

4.1實驗結(jié)果

表3 人血白蛋白中氮含量的測試數(shù)據(jù)

蛋白氮含量=（32.248-0.29）×6.25=199.7375mg/mL

4.2結(jié)論

從實驗結(jié)果可以看到，采用K1100F凱氏定氮儀可以準確的檢測人血白蛋白中的總氮含量。樣品中非蛋白氮含量較低，可能會影響結(jié)果平行性。

參考文獻

[1] 國家藥典委員會. 中華人民共和國藥典[ M ] . 四部. 北京: 中國醫(yī)藥科技出版社, 2015: 附錄0731蛋白質(zhì)含量測定第一法凱氏定氮法