凱氏定氮法測(cè)定靈芝粉中蛋白質(zhì)含量

1 前言

靈芝粉，用靈芝磨成的粉末狀物質(zhì)。靈芝粉的主要成分是靈芝多糖、靈芝酸、腺苷以及10多種堿、油酸、纖維素、氨基酸、微量元素等。下面為大家介紹一下其中蛋白質(zhì)含量測(cè)定方法。

2 實(shí)驗(yàn)部分

2.1原理

靈芝粉中的有機(jī)態(tài)氮在濃硫酸和催化劑的共同作用下，轉(zhuǎn)化為氨態(tài)氮。加堿蒸餾后，用硼酸吸收后，再以鹽酸或硫酸標(biāo)準(zhǔn)滴定液進(jìn)行滴定。

2.2 儀器與試劑、器具

2.2.1 K1100F全自動(dòng)凱氏定氮儀(濟(jì)南海能儀器股份有限公司)。

2.2.2 SH420F石墨消解儀(濟(jì)南海能儀器股份有限公司)。

2.2.3 鹽酸分析純，c(HCL)=0.1mol/L，標(biāo)準(zhǔn)滴定液。

2.2.4 硼酸分析純，質(zhì)量分?jǐn)?shù)2%。

2.2.5 氫氧化鈉分析純，質(zhì)量分?jǐn)?shù)40%。

2.2.6 溴甲酚綠-甲基紅混合指示劑將溴甲酚綠乙醇溶液(1g/L)與甲基紅乙醇溶液(1g/L)按5：1體積比臨時(shí)混合搖勻備用。

2.2.7 催化劑片 3g硫酸鉀和0.2g硫酸銅混合均勻壓片

2.2.8 10mL移液管

2.3 實(shí)驗(yàn)部分

2.3.1取樣：取0.5g左右樣品，加催化劑一片（或硫酸鉀3g與硫酸銅0.2g)，再沿瓶壁滴加硫酸10.0ml.

2.3.2消解：利用石墨消解爐進(jìn)行消解，將消化管放在石墨爐上，蓋上排氣罩，連接廢氣吸收系統(tǒng)，消化完畢后，將消化管取下冷卻至室溫。消化過程采用曲線升溫模式，設(shè)置參數(shù)如下：

2.3.3 待消化管內(nèi)溶液冷卻至室溫后，將消化管放置于定氮儀上。定氮儀設(shè)置程序如下：

稀釋水：30ml

硼酸： 25ml

堿： 35ml

蒸餾時(shí)間：5min

2.3.4 儀器自動(dòng)滴定并給出計(jì)算結(jié)果。

3 結(jié)果與討論

式中：M-標(biāo)準(zhǔn)酸摩爾濃度（mol/L)

W-樣品質(zhì)量（g）

V0-空白樣滴定標(biāo)準(zhǔn)酸消耗量（mL）

V-樣品滴定標(biāo)準(zhǔn)酸消耗量（mL），精確到小數(shù)點(diǎn)后四位

6.25-樣品蛋白系數(shù)