凱氏定氮法測定葵花籽中蛋白質(zhì)含量
1 前言
瓜子營養(yǎng)豐富,維生素、蛋白質(zhì)、油類含量都屬佼佼者。并且對安定情緒、防止老化、預(yù)防成人疾病有益;能治失眠、增強(qiáng)記憶力;預(yù)防癌癥、高血壓、心臟病等疾病。下面為大家介紹一下葵花籽中蛋白質(zhì)含量的測定方法。
2 實驗部分
2.1原理
葵花籽中的有機(jī)態(tài)氮在濃硫酸和催化劑的共同作用下,轉(zhuǎn)化為氨態(tài)氮。加堿蒸餾,用硼酸吸收后,再以鹽酸或硫酸標(biāo)準(zhǔn)滴定液進(jìn)行滴定。
2.2 儀器與試劑、器具
2.2.1 K1100F全自動凱氏定氮儀(濟(jì)南海能儀器股份有限公司)。
2.2.2 SH420F石墨消解儀(濟(jì)南海能儀器股份有限公司)。
2.2.3 鹽酸 分析純,c(HCL)=0.1mol/L,標(biāo)準(zhǔn)滴定液。
2.2.4 硼酸 分析純,質(zhì)量分?jǐn)?shù)2%。
2.2.5 氫氧化鈉 分析純,質(zhì)量分?jǐn)?shù)40%。
2.2.6 溴甲酚綠-甲基紅混合指示劑 將溴甲酚綠乙醇溶液(1g/L)與甲基紅乙醇溶液(1g/L)按5:1體積比臨時混合搖勻備用。
2.2.7 催化劑片 3g硫酸鉀和0.2g硫酸銅混合均勻壓片
2.2.8 10mL移液管
2.2.9 研缽
2.3 實驗部分
2.3.1取樣:將樣品磨碎,精確稱量0.5g的樣品,加催化劑一片(或硫酸鉀3g與硫酸銅0.2g),再沿瓶壁滴加硫酸10.0ml.
2.3.2消解:利用石墨消解爐進(jìn)行消解,將消化管放在石墨爐上,蓋上排氣罩,連接廢氣吸收系統(tǒng),消化完畢后,將消化管取下冷卻至室溫。消化過程采用曲線升溫模式,設(shè)置參數(shù)如下:
2.3.3 待消化管內(nèi)溶液冷卻至室溫后,將消化管放置于定氮儀上。定氮儀設(shè)置程序如下:
稀釋水:30ml
硼酸: 25ml
堿: 35ml
蒸餾時間:5min
2.3.4 儀器自動滴定并給出計算結(jié)果。
3 結(jié)果與討論
式中:M-標(biāo)準(zhǔn)酸摩爾濃度(mol/L)
W-樣品質(zhì)量(g)
V0-空白樣滴定標(biāo)準(zhǔn)酸消耗量(mL)
V-樣品滴定標(biāo)準(zhǔn)酸消耗量(mL),精確到小數(shù)點后四位
5.30-樣品蛋白系數(shù)
