凱氏定氮法測(cè)定揮發(fā)性鹽基氮含量
1 前言
揮發(fā)性鹽基氮多見(jiàn)于水產(chǎn)品等肉類(lèi)中，它是指腐敗過(guò)程中，由于酶和細(xì)菌的作用使蛋白質(zhì)分解而產(chǎn)生氨以及胺類(lèi)等堿性含氮物質(zhì)。此類(lèi)物質(zhì)具有揮發(fā)性，使用高氯酸溶液浸提，在堿性溶液中蒸出后，用硼酸吸收液吸收，再以標(biāo)準(zhǔn)滴定酸溶液滴定計(jì)算含量。
2 實(shí)驗(yàn)部分
2.1 儀器
Hanon K9840半自動(dòng)凱氏定氮儀
均質(zhì)機(jī)
離心機(jī)
微量酸式滴定管：精確到0.01ml
2.2 試劑
高氯酸溶液（0.6mol/L）：取50ml高氯酸加水定容至1000ml
氫氧化鈉溶液（30g/L）：稱取30g氫氧化鈉加水溶解后，放冷，并稀釋到1000ml
鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液（0.01mol/L）：吸取濃鹽酸0.85ml，定容至1000ml，搖勻。并按GB/T 5009.12003附錄B的方法進(jìn)行標(biāo)定。
硼酸吸收液（30g/L）：稱取硼酸30g，溶于1000ml水中。按10:1比例加入混合指示劑
硅油消泡劑
酚酞指示劑
混合指示劑：將一份2g/L甲基紅乙醇溶液與一份1g/L次甲基藍(lán)乙醇溶液臨用時(shí)混合
2.3 實(shí)驗(yàn)步驟
2.3.1 樣品處理
魚(yú)，去鱗，去皮，沿背脊取肌肉；蝦，去頭，去殼，取可食肌肉部分；蟹，甲魚(yú)等（其他水產(chǎn)品）取可食部分；將樣品切碎備用。
2.3.2 樣品制備
稱取上述處理好的試樣10g（精確到0.01g）于均質(zhì)杯中，再加入90ml高氯酸溶液，均質(zhì)2min，用濾紙過(guò)濾或離心分離。準(zhǔn)確移取5.0ml濾液于消化管中，分別加入1-2滴酚酞指示劑，1-2滴硅油防泡劑。并用5.0ml高氯酸溶液做空白試驗(yàn)。
2.3.3 蒸餾
消化管就位。儀器參數(shù)設(shè)置：氫氧化鈉溶液5ml，稀釋水10ml，硼酸20ml，蒸餾5min，淋洗液10ml。
2.3.4 滴定
錐形瓶中吸收液用標(biāo)準(zhǔn)鹽酸或硫酸溶液（0.01mol/L）滴定至溶液顯藍(lán)紫色為終點(diǎn)。
2.3.5 計(jì)算
其中：
X-----樣品中揮發(fā)性鹽基氮的含量，單位為毫克每百克（mg/100g）；
V-----樣品濾液消耗的標(biāo)準(zhǔn)滴定酸的體積，單位為毫升（ml）；
V0-----空白樣品消耗的標(biāo)準(zhǔn)滴定酸的體積，單位為毫升（ml）；
C-----鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的摩爾濃度，單位為摩爾每升（mol/L）；
14-----與1.00ml鹽酸標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液（1.00mol/L）相當(dāng)?shù)牡馁|(zhì)量，單位為毫克（mg）；
m------取樣質(zhì)量，單位為克（g）。
計(jì)算結(jié)果保留3位有效數(shù)字。