凱氏定氮法測定海參中蛋白質(zhì)含量

前言

海參是海底動物群落中的一種，其含膽固醇低，脂肪含量相對少，是典型的高蛋白、低脂肪、低膽固醇食物。《GB 31602-2015 食品安全國家標準干海參（2016-11-13實施）》中，明確規(guī)定干海參蛋白質(zhì)含量不得少于40%。

實驗部分

1.1實驗原理

海參中的有機態(tài)氮在濃硫酸和催化劑的共同作用下，轉化為氨態(tài)氮。加堿蒸餾，使氨析出，用硼酸吸收后，再以鹽酸或硫酸標準滴定液進行滴定。

1. 2 儀器與設備

K1160 全自動凱氏定氮儀

SH 420F 石墨消解儀

1. 3 試劑與耗材

實驗中涉及到的試劑，均為優(yōu)級純或分析純；實驗用水為無氨蒸餾水。

1.3.1 鹽酸或硫酸溶液：c(H ⁺ )= 0 . 1mol /L ，標準滴定液。

1. 3 . 2 硼酸溶液：質(zhì)量分數(shù) 2% 。

1. 3. 3 氫氧化鈉溶液：質(zhì)量分數(shù) 40% 。

1. 3. 4 溴甲酚綠 - 甲基紅混合指示劑：將溴甲

酚綠乙醇溶液 (1g/ L) 與甲基紅乙醇溶液(1g/ L) 按 5 ： 1 體積比臨時混合搖勻備用。

1. 3 . 5 催化劑片： 3g 硫酸鉀和 0. 2g 硫酸銅混合均勻壓片

1. 4 實驗過程

1 . 4 . 1 取樣

準確稱量0.2g 的樣品（精確至 0 . 1mg ），加催化劑一片（或硫酸鉀 5g 與硫酸銅 0 . 5g) ，再沿瓶壁滴加硫酸 8.5mL 。

1 . 4 .2 消解

利用石墨消解爐進行消解，將消化管放在石墨爐上，蓋上排氣罩，連接廢氣吸收系統(tǒng)，設定消解溫度參數(shù)如下表：

消化完畢后，將消化管取下冷卻。

1 . 4 . 3 上機測試

待消化管內(nèi)溶液冷卻至室溫后，將消化管放置于定氮儀上，開始蒸餾滴定。定氮儀設置程序如下：

式中：M-標準酸摩爾濃度（mol/L)

W-樣品質(zhì)量（g）

V0-空白樣滴定標準酸消耗量（mL）

V-樣品滴定標準酸消耗量（mL）

6.25-樣品蛋白系數(shù)

結果與討論

使用凱氏定氮儀測試海參中蛋白質(zhì)含量，結果準確，平行性良好。符合《GB 31602-2015 食品安全國家標準干海參（2016-11-13實施）》中的要求。