凱氏定氮法測定短肽型腸內(nèi)營養(yǎng)劑中蛋白質(zhì)含量
1前言
短肽型腸內(nèi)營養(yǎng)劑,適應(yīng)癥為本品適用于胃腸道功能有損失,而不能或不愿進(jìn)食足夠數(shù)量的常規(guī)食物以滿足機(jī)體營養(yǎng)需求的應(yīng)進(jìn)行腸內(nèi)營養(yǎng)治療的病人。作為營養(yǎng)物質(zhì),短肽型腸內(nèi)營養(yǎng)劑含有豐富的蛋白質(zhì)。常規(guī)的蛋白質(zhì)測定方法有凱氏定氮法,分光光度法以及燃燒法,其中以凱氏定氮法應(yīng)用最為廣泛。但傳統(tǒng)的玻璃儀器具有操作繁瑣,耗時長,危險性高等缺點。本文采用《中國藥典》2015年版中氮測定法第三法以全自動凱氏定氮儀進(jìn)行實驗,操作簡單,測得結(jié)果平行性良好。
2 儀器與試劑
2.1儀器
K1100F全自動凱氏定氮儀,SH420F石墨消解儀
2.2試劑
硫酸(分析純)、硼酸(分析純)、氫氧化鈉(分析純)、溴甲酚綠-甲基紅混合指示劑、催化劑片(3g硫酸鉀和0.2g硫酸銅混合均勻壓片)、0.1mol/L硫酸標(biāo)準(zhǔn)滴定液等。
3 實驗部分
3.1取樣
稱取樣品0.3g(精確至0.1mg),加催化劑一片(或硫酸鉀3g與硫酸銅0.2g),再加硫酸10mL。同時做空白實驗。
3.2消解
待消化管內(nèi)溶液冷卻至室溫后,將消化管放置于定氮儀上。定氮儀設(shè)置程序如下:
4 結(jié)果與討論
4.1實驗結(jié)果:儀器自動滴定并計算,計算公式如下:
式中:C-標(biāo)準(zhǔn)酸摩爾濃度(mol/L)
W-樣品質(zhì)量(g)
V0-空白樣滴定標(biāo)準(zhǔn)酸消耗量(mL)
V-樣品滴定標(biāo)準(zhǔn)酸消耗量(mL)
6.25-樣品蛋白系數(shù)
4.2實驗結(jié)論
通過以上測得數(shù)據(jù)可知,利用全自動凱氏定氮儀測定短肽型腸內(nèi)營養(yǎng)劑中的粗蛋白質(zhì)含量平行性良好,且具有操作簡單,安全性高,節(jié)省人力等優(yōu)點。
參考文獻(xiàn)
[1] 國家藥典委員會. 中華人民共和國藥典[M] . 三部. 北京: 中國醫(yī)藥科技出版社, 2015:通則49.
