凱氏定氮法測定初乳堿性蛋白粉中蛋白質(zhì)含量
1 前言
初乳堿性蛋白(Colostrum basic protein,簡稱CBP)。牛初乳作為一種營養(yǎng)珍品應(yīng)用已超過50年,初乳不僅蛋白含量高,而且含有許多其它乳制品中沒有的珍稀蛋白,CBP(初乳堿性蛋白)就是其中之一,它從牛初乳中僅能萃取出萬分之四。CBP是國際上近幾年最新提取成功并用于保健領(lǐng)域的初乳精華。2009年被批準(zhǔn)為新資源食品。
本文采用全自動凱氏定氮儀代替原有玻璃器具和半自動儀器完成實(shí)驗(yàn),具有操作簡便,實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)準(zhǔn)確、重復(fù)性好等優(yōu)點(diǎn)。
2 儀器與試劑
2.1儀器
K1160全自動凱氏定氮儀,SH420F石墨消解儀,分析天平
2.2試劑
硫酸(分析純),硼酸(分析純),氧化鈉(分析純),溴甲酚綠-甲基紅混合指示劑,催化劑片(3g硫酸鉀和0.2g硫酸銅混合均勻壓片),0.1mol/L鹽酸標(biāo)準(zhǔn)滴定液。
3 實(shí)驗(yàn)方法
3.1 樣品消解
稱取0.1g左右樣品,加催化劑一片(或硫酸鉀3g與硫酸銅0.2g),再沿瓶壁滴加硫酸10.0ml。
利用石墨消解儀進(jìn)行消解,將消化管放在石墨爐上,蓋上排氣罩,連接廢氣吸收系統(tǒng),消化完畢后,將消化管取下冷卻至室溫。消化過程采用曲線升溫模式,設(shè)置參數(shù)如下:

式中:c-標(biāo)準(zhǔn)酸摩爾濃度(mol/L)
W-樣品質(zhì)量(g)
V0-空白樣滴定標(biāo)準(zhǔn)酸消耗量(mL)
V-樣品滴定標(biāo)準(zhǔn)酸消耗量(mL),精確到小數(shù)點(diǎn)后四位
4.2結(jié)論
通過數(shù)據(jù)可知,利用全自動凱氏定氮法測定初乳堿性蛋白粉中的蛋白質(zhì)含量平行性良好,且具有操作簡單,安全性高,節(jié)省人力等優(yōu)點(diǎn)。
參考文獻(xiàn)
[1] GB 5009.5-2016 食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中蛋白質(zhì)的測定[S].
注意事項(xiàng)
初乳堿性蛋白粉中蛋白含量較高,取樣及消解時(shí)應(yīng)注意減少誤差。可以用稱量紙包裹住樣品投入消化管中,以防止樣品粘在消化管上部。實(shí)驗(yàn)過程中濃酸濃堿具有強(qiáng)烈腐蝕性,請小心操作。
