電位滴定儀-凱氏定氮儀聯(lián)用檢測蛋白粉中的蛋白質(zhì)含量
1.前言
所謂蛋白粉，一般是采用提純的大豆蛋白、酪蛋白、乳清蛋白(缺乏異亮氨酸)、豌豆蛋白或上述幾種蛋白的組合(如大豆蛋白、乳清蛋白和豌豆蛋白組成的復合蛋白)構成的粉劑，蛋白質(zhì)是保證機體健康最重要的營養(yǎng)素，它是維持和修復機體以及細胞生長所必需的，不僅影響機體組織如肌肉的生長，還參與激素的產(chǎn)生、免疫功能的維持、其它營養(yǎng)物質(zhì)和氧的轉運以及血紅蛋白的生成、血液凝結等多方面。但是蛋白質(zhì)攝入過多，不但是一種浪費，而且對人體健康也是有危害的。
2.實驗原理
食品中的蛋白質(zhì)在催化加熱條件下被分解，產(chǎn)生的氨與硫酸結合生成硫酸銨。堿化蒸餾使氨游離，用硼酸吸收后用硫酸或鹽酸標準滴定液滴定，根據(jù)酸的消耗量乘以換算系數(shù)，即為蛋白質(zhì)的含量。
3.實驗儀器
石墨消解爐，K9840凱氏定氮儀，T960電位滴定儀
4.實驗試劑
滴定劑:C(H2SO4))=0.100mol/L, 滴定劑的濃度按照國標標定、硼酸溶液(20g/l)、甲基紅-溴甲酚綠乙醇混合溶液：1：5、催化劑片(硫酸銅0.2g，硫酸鉀3g)、蛋白粉(市售)
5.測定方法
1)樣品制備
萬分之一天平稱取0.2g蛋白粉樣品(精確到0.1mg)，無屑稱量紙包好一并投入300ml消化管中。
2)消解
消化管中加入一片催化劑片(硫酸銅0.2g，硫酸鉀3g)和10ml濃硫酸，輕輕搖動使充分混合，并作空白實驗。消化管架放置在石墨爐上，蓋上廢氣罩，并打開廢棄吸收系統(tǒng)。消化管采用曲線升溫模式，200℃維持20min460℃維持60min左右。消化完成后，取出消化管，冷卻至室溫。
3)蒸餾
K9840凱氏定氮儀清洗空蒸結束后，按標準設置好儀器，將消化好的樣品安裝在儀器上蒸餾。
4)滴定
吸收液在電位滴定儀T960上用0.1mol/l的硫酸標準滴定液滴定至終點。
5.測試結果
1)參數(shù)設置
蒸餾參數(shù)設置：
該蛋白粉中含氮量平均值為13.25%，蛋白質(zhì)量平均值為82.80%。
7.參考文獻
1) GB/T 601- 2002 化學試劑標準滴定溶液的制備[S].北京: 中國標準出版社, 2003.
2)GB 5009.5-2010 食品安全國家標準 食品中蛋白質(zhì)的測定第一法凱氏定氮法.