電位滴定法檢測酸奶中的還原糖含量
1 前言
還原糖是指具有還原性的糖類，包括葡萄糖、果糖、半乳糖、乳糖、麥芽糖等，是食品檢測的重要指標之一。還原糖常用的測定方法有直接滴定法、高錳酸鉀滴定法和比色法。本文使用電位滴定儀改進了直接滴定法的內(nèi)容，簡化了操作步驟，避免了顏色判定的誤差，實驗結果重復性良好。
2 儀器與試劑
2.1 儀器
Hanon T960全自動電位滴定儀，Hamilton高溫鉑復合電極和pH復合電極，10ml滴定管單元，電陶爐
2.2 試劑
相關配制見附錄。
鹽酸溶液(1+1)，堿性酒石酸銅甲液，堿性酒石酸銅乙液，乙酸鋅溶液，亞鐵氰化鉀溶液(106g/L)，氫氧化鈉溶液(40g/L)，葡萄糖標準溶液(1.0mg/mL) ，硝酸溶液（10%）
3 實驗方法
3.1 實驗步驟
（1）樣品前處理
稱取酸奶5~25g，(精確至0.001g，實稱20.3916g)，移置250mL容量瓶中，加50mL水，緩慢加入乙酸鋅溶液5mL和亞鐵氰化鉀溶液5mL，加水至刻度，混勻，轉入燒杯中靜置30min，用干燥濾紙過濾，棄去初濾液，取后續(xù)濾液備用。
（2）堿性酒石酸銅溶液的標定
吸取堿性酒石酸銅甲液5.0mL和堿性酒石酸銅乙液5.0mL，置于滴定杯中。加水10mL，加入葡萄糖標準溶液9.0mL，將電陶爐設為內(nèi)環(huán)火500℃，控制在2min中內(nèi)加熱至沸，保持沸騰開始滴定至終點，記錄消耗葡萄糖的總體積，同時平行操作3份，取其平均值，計算每10mL(堿性酒石酸甲、乙液各5.0mL)堿性酒石酸銅溶液相當于葡萄糖的質(zhì)量(mg)。
（3） 試樣溶液預測
吸取堿性酒石酸銅甲液5.0mL和堿性酒石酸銅乙液5.0mL于滴定杯中，加水10mL，將電陶爐設為內(nèi)環(huán)火500℃，控制在2min內(nèi)加熱至沸，選擇“動態(tài)滴定”模式，保持沸騰開始滴定至終點，記錄樣液消耗體積。
（4）試樣溶液測定
吸取堿性酒石酸銅甲液5.0mL和堿性酒石酸銅乙液5.0mL，置于滴定杯中，加水10mL，加入試樣溶液3.0mL，將電陶爐設為內(nèi)環(huán)火500℃，控制在2min內(nèi)加熱至沸，保持沸騰開始滴定至終點，記錄樣液消耗體積，同法平行操作六份，得出平均消耗體積。
3.2 儀器參數(shù)設置
4.3 結論
國標中要求在重復性條件下獲得的兩次獨立測定結果的絕對差值不得超過算術平均值的5%。根據(jù)實驗得知，圖譜出現(xiàn)峰值時溶液藍色剛好褪去，證實用電位滴定儀采用直接滴定法測定還原糖重復性良好。
參考文獻
[1] GB 5009.7-2016 食品安全國家標準 食品中還原糖的測定[S].
注意事項
1 樣品前處理
棄去的初濾液為剛開始滴的20滴左右。
2 堿性酒石酸銅溶液的標定
（1）保持開啟電陶爐500℃的內(nèi)環(huán)火，樣品實際沸騰時間約為90s。
（2）精確移取9.0mL葡萄糖溶液，將帶有攪拌槳、進樣管和鉑復合電極的手動操作臺從滑桿上拿出并扣在滴定杯上，建立并選擇“手動模式”方法，滴加9.0mL葡萄糖溶液。完成后將滴定杯和操作臺一并放在電陶爐上，攪拌并開始計時。
3 試樣溶液測定
（1）預測時儀器方法選擇“動態(tài)滴定”，參數(shù)除滴定速度選擇“極快”外同3.2一致。
（2）消耗體積約為4.2mL，所以實際測定時以“手動模式”預先加入3.0mL試樣溶液。
4 滴定管
建議在每次測定前排出滴定管中的氣泡，保證管內(nèi)充滿液體。
5 清洗電極
每次測定后用硝酸溶液（10%）清洗電極鉑環(huán)，以保證響應良好。
附錄
1）鹽酸溶液(1+1)：量取濃鹽酸50mL，加水50mL混勻；
2）堿性酒石酸銅甲液：稱取無水硫酸銅4.8g和亞甲藍0.025g，溶于水中，并稀釋至500mL；
3）堿性酒石酸銅乙液：稱取酒石酸鉀鈉25g和氫氧化鈉37.5g，溶解于水中，再加入亞鐵氰化鉀2g，完全溶解后，用水定容至500mL，貯存于橡膠塞玻璃瓶中；
4）乙酸鋅溶液：稱取乙酸鋅21.9g，加冰乙酸3mL，加水溶解并定容于100mL；
5）亞鐵氰化鉀溶液(106g/L)：稱取亞鐵氰化鉀10.6g，加水溶解并定容至100mL；
6）氫氧化鈉溶液(40g/L)：稱取氫氧化鈉4g，加水溶解后，放冷，并定容至100mL；
7）葡萄糖標準溶液(1.0mg/mL)：準確稱取經(jīng)過98℃~100℃烘箱中干燥2h后的葡萄糖0.5g，加水溶解后加入鹽酸溶液2.5mL，并用水定容至500mL。此溶液每毫升相當于1.0mg葡萄糖。