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前言

試樣經(jīng)除去蛋白質(zhì)后，其中還原糖把銅鹽還原為氧化亞銅，加硫酸鐵后，氧化亞銅被氧化為銅鹽，經(jīng)高錳酸鉀溶液滴定氧化作用后生成的亞鐵鹽，根據(jù)高錳酸鉀消耗量，計(jì)算氧化亞銅含量，再查表得還原糖量。

實(shí)驗(yàn)部分

1.1實(shí)驗(yàn)儀器

HanonT960自動(dòng)電位滴定儀，鉑復(fù)合電極，10ml滴定管單元，常用天平

1.2試劑與溶液

實(shí)驗(yàn)中涉及到的試劑，均為優(yōu)級(jí)純或分析純；實(shí)驗(yàn)用水為三級(jí)純凈水。

1.2.1 堿性酒石酸銅甲液：稱取無(wú)水硫酸銅11.08448g，加適量水溶解，加硫酸0.25mL，再加水稀釋至250mL；

1.2.2 堿性酒石酸銅乙液：稱取酒石酸鉀鈉86.5g與氫氧化鈉25g，加適量水溶解，并稀釋至250mL，貯存于橡膠塞玻璃瓶?jī)?nèi)；

1.2.3 氫氧化鈉溶液(40g/L)：稱取氫氧化鈉4g，加水溶解并稀釋至100mL；

1.2.4 硫酸鐵溶液(50g/L)：稱取硫酸鐵12.5g，加水50mL溶解后，慢慢加入硫酸25mL，冷后加水稀釋至250mL。

1.2.5 高錳酸鉀標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液[c(1/5KMnO₄)=0.1000mol/L]：稱取0.825g高錳酸鉀，溶于263mL水中，緩緩煮沸15min，冷卻，于暗處放置。

1.3實(shí)驗(yàn)過(guò)程

儀器準(zhǔn)備，請(qǐng)參照說(shuō)明書(shū)。

1.3.1實(shí)驗(yàn)步驟：

樣品的前處理：稱取試樣25g左右(精確至0.001g)，移至250mL容量瓶中，加水50mL，搖勻后加堿性酒石酸銅甲液10mL及氫氧化鈉溶液4mL，加水至刻度，混勻。靜置30min，用干燥濾紙過(guò)濾，棄去初濾液，取后續(xù)濾液備用。

試樣溶液的測(cè)定：

（1）精確吸取處理后的試樣溶液5.0mL于燒杯內(nèi)，加入堿性酒石酸銅甲液2.5mL及堿性酒石酸銅乙液2.5mL。于燒杯上蓋一表面皿，在預(yù)先打開(kāi)的電爐上加熱，控制在4min內(nèi)沸騰，再精確煮沸2min。在布氏漏斗上蓋一層濾紙，趁熱抽濾。抽濾時(shí)需將溶液沿玻璃棒緩慢傾倒至濾紙上，以防氧化亞銅沿濾紙邊緣流失。

（2）用60℃熱水洗滌燒杯及沉淀至少三次，至洗液不呈堿性為止。將濾紙放回原燒杯，加硫酸鐵溶液20mL，用玻棒攪拌濾紙使附著的氧化亞銅完全溶解，提起濾紙用約30mL水將上面的溶液沖洗干凈。以高錳酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定，記錄用量。

1.3.2計(jì)算結(jié)果

試樣中還原糖質(zhì)量相當(dāng)于氧化亞銅的質(zhì)量，按下式計(jì)算：

X₀=(V-V₀)×c×71.54

式中：

X₀          --試樣中還原糖質(zhì)量相當(dāng)于氧化亞銅的質(zhì)量，mg；

V        --測(cè)定用試樣液消耗高錳酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積，mL；

V₀          --試劑空白消耗高錳酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積，mL；

C         --高錳酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液的實(shí)際濃度，mol/L；

71.54   --1mL高錳酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液[c(1/5)KMnO4]=1.000mol/L)相當(dāng)于氧化亞銅的質(zhì)量，mg。

根據(jù)式中計(jì)算所得氧化亞銅質(zhì)量，查表A.1，再計(jì)算試樣中還原糖含量（以乳糖計(jì)），按下式計(jì)算：

式中：

X    --試樣中還原糖的含量， g/100g；

m₃    --X₀查附錄A之表1得還原糖質(zhì)量， mg；

m₄   --試樣質(zhì)量或體積， g或mL；

V     --測(cè)定用試樣溶液的體積 ，mL；

250  --試樣處理后的總體積，mL。

還原糖含量≥10g/100g時(shí)，計(jì)算結(jié)果保留三位有效數(shù)字；還原糖含量<10g/100g時(shí)，計(jì)算結(jié)果保留兩位有效數(shù)字。

在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨(dú)立測(cè)定結(jié)果的絕對(duì)差值不得超過(guò)算術(shù)平均值的10%。

1.4結(jié)果與討論

1.4.1滴定參數(shù)