電位滴定法檢測牛奶中的還原糖含量
1 前言
試樣經(jīng)除去蛋白質(zhì)后,以亞甲藍(lán)作指示劑,在加熱條件下滴定標(biāo)定過的堿性酒石酸銅溶液(已用還原糖標(biāo)準(zhǔn)溶液標(biāo)定),根據(jù)樣品液消耗體積計算還原糖含量。
2 儀器與試劑
2.1 儀器
Hanon T960全自動電位滴定儀,Hamilton高溫鉑復(fù)合電極,10ml滴定管單元,電陶爐
2.2 試劑
相關(guān)配制見附錄。
鹽酸溶液(1+1),堿性酒石酸銅甲液,堿性酒石酸銅乙液,乙酸鋅溶液,亞鐵氰化鉀溶液(106g/L),氫氧化鈉溶液(40g/L),葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液(1.0mg/mL)
3 實驗方法
3.1 實驗步驟
(1)樣品前處理
稱取牛奶25g,(精確至0.001g),移置250mL容量瓶中,加50mL水,緩慢加入乙酸鋅溶液5mL和亞鐵氰化鉀溶液5mL,加水至刻度,混勻,靜置30min,用干燥濾紙過濾,棄去初濾液,取后續(xù)濾液備用。
(2)堿性酒石酸銅溶液的標(biāo)定
吸取堿性酒石酸銅甲液5.0mL和堿性酒石酸銅乙液5.0mL,置于滴定杯中。加水10mL,加入葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液9mL,將電陶爐設(shè)為內(nèi)環(huán)火500℃,控制在2min中內(nèi)加熱至沸,然后調(diào)至300℃,趁熱以1滴/2s的速度繼續(xù)滴加葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液直至溶液藍(lán)色剛好褪去為終點,記錄消耗葡萄糖的總體積,同時平行操作3份,取其平均值,計算每10mL(堿性酒石酸甲、乙液各5mL)堿性酒石酸銅溶液相當(dāng)于葡萄糖(或其他還原糖)的質(zhì)量(mg)。
(3)試樣溶液測定
吸取堿性酒石酸銅甲液5.0mL和堿性酒石酸銅乙液5.0mL,置于滴定杯中,加水10mL,預(yù)先加入2mL的試樣溶液至滴定杯中,控制在2min內(nèi)加熱至沸,保持沸騰繼續(xù)以1滴/2s的速度滴加試樣溶液,滴定直至藍(lán)色剛好褪去為終點,記錄樣液消耗體積,同法平行操作三份,得出平均消耗體積(V)。
3.2 參數(shù)設(shè)置

4 結(jié)果與討論
4.1 實驗結(jié)果
(1)標(biāo)定堿性酒石酸銅
式中:
X --試樣中還原糖的含量(以葡萄糖糖計),單位為克每百克(g/100g);
m1 --堿性酒石酸銅溶液(甲、乙液各半)相當(dāng)于葡萄糖的質(zhì)量,單位為毫克(mg);
m --試樣質(zhì)量,單位為克(g);
F --系數(shù),為1;
V --測定時平均消耗試樣溶液體積,單位為毫升(mL);
250 --定容體積,單位毫升(mL)。
4.2 曲譜圖
(1)標(biāo)定堿性酒石酸銅
(2)牛奶
4.3 結(jié)論
國標(biāo)中要求在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨立測定結(jié)果的絕對差值不得超過算術(shù)平均值的5%。根據(jù)實驗數(shù)據(jù)得知,電位滴定儀對直接滴定法重復(fù)性良好。
參考文獻
[1]GB 5009.7-2016 食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中還原糖的測定[S].
注意事項
保持開啟電陶爐500℃的內(nèi)環(huán)火,樣品實際沸騰時間約為90s。沸騰后調(diào)低為300℃以防止暴沸。標(biāo)定堿性酒石酸銅溶液應(yīng)精確移取9mL葡萄糖溶液,可用電位滴定儀的手動滴定模式添加。
附錄
1)鹽酸溶液(1+1):量取鹽酸50mL,加水50mL混勻;
2)堿性酒石酸銅甲液:稱取無水硫酸銅2.4g和亞甲藍(lán)0.0125g,溶于水中,并稀釋至250mL;
3)堿性酒石酸銅乙液:稱取酒石酸鉀鈉12.5g和氫氧化鈉18.75g,溶解于水中,再加入亞鐵氰化鉀1g,完全溶解后,用水定容至250mL,貯存于橡膠塞玻璃瓶中;
4)乙酸鋅溶液:稱取乙酸鋅21.9g,加冰乙酸3mL,加水溶解并定容于100mL;
5)亞鐵氰化鉀溶液(106g/L):稱取亞鐵氰化鉀10.6g,加水溶解并定容至100mL;
6)氫氧化鈉溶液(40g/L):稱取氫氧化鈉4g,加水溶解后,放冷,并定容至100mL;
7)葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液(1.0mg/mL):準(zhǔn)確稱取經(jīng)過98℃~100℃烘箱中干燥2h后的葡萄糖0.5g,加水溶解后加入鹽酸溶液2.5mL,并用水定容至500mL。此溶液每毫升相當(dāng)于1.0mg葡萄糖。
